FISH探針加樣的注意事項(xiàng)
更新時(shí)間：2022-12-26 點(diǎn)擊次數(shù)：1879
FISH探針可分為位點(diǎn)特異性探針和著絲粒探針，位點(diǎn)特異性探針又可分為計(jì)數(shù)探針和融合/分離探針。計(jì)數(shù)探針是通過(guò)標(biāo)記一段特異性的DNA片段，通過(guò)計(jì)數(shù)信號(hào)的數(shù)量而判斷染色體或基因狀態(tài)的一種標(biāo)記探針。由于正常人的染色體/基因是二倍體，那么正常人的檢測(cè)信號(hào)就是兩個(gè)，當(dāng)信號(hào)多于兩個(gè)或者少于兩個(gè)，便可判斷染色體或者基因發(fā)生了異常。
FISH探針基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針?lè)肿犹禺愋越Y(jié)合來(lái)檢測(cè)DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對(duì)定量分析。
該技術(shù)具有快速、安全、靈敏度高以及探針可長(zhǎng)期保存等特點(diǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞遺傳學(xué)、腫瘤生物學(xué)、基因定位、基因作圖、基因擴(kuò)增、產(chǎn)前診斷及哺乳動(dòng)物染色體進(jìn)化研究等領(lǐng)域。
FISH探針的加樣：參照選用廠商推薦或經(jīng)過(guò)本實(shí)驗(yàn)室有效性驗(yàn)證納入標(biāo)準(zhǔn)化操作流程文件的探針加樣量，加到待雜交組織中央處，使用合適的蓋玻片，橡膠水泥密封四邊。
注意事項(xiàng)：
探針的使用和配制遵照本單位選用試劑的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)操作；
蓋玻片一般采用硅化蓋玻片或無(wú)菌的蠟?zāi)ぃ?/div>
注意環(huán)境光強(qiáng)度，避免太陽(yáng)光或強(qiáng)烈的光照；
加蓋玻片時(shí)注意不要留有氣泡，避免因氣泡造成干片現(xiàn)象，導(dǎo)致無(wú)雜交信號(hào)或雜交率降低；
蓋玻片邊緣封膠不嚴(yán)密也會(huì)出現(xiàn)干片現(xiàn)象。
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