一、RNA HS Assay Kit存放条件与注意事项：
1.温度要求
未开封试剂盒：存放在-20℃，避免反复冻融。
已开封试剂盒：密封后可短期存放于4℃，建议1个月内用完，避免活性成分降解。
关键组分：若频繁使用，可分装后存于-20℃，减少冻融次数。
2.防潮与避光
试剂盒应远离潮湿环境，避免吸湿导致粉末结块或酶失活。
避光保存荧光染料、底物等光敏成分，可用铝箔纸包裹试剂盒或存放于暗盒中。
3.防止污染
开封后立即盖紧管盖，操作时避免说话、咳嗽等产生气溶胶污染。
使用前后擦拭操作台和移液器，建议在超净工作台内操作。
二、RNA HS Assay Kit使用前准备：
1.试剂检查
离心确认：开盖前轻柔离心，确保管壁残留液体沉底。
溶解沉淀：若试剂因运输出现结晶，需室温缓慢溶解并混匀，避免高温或超声波破碎。
有效期验证：检查试剂瓶标签上的有效期和批次号，过期或性状异常的试剂勿用。
2.实验设计优化
设置对照组：每次实验需包含无模板对照（NTC）、阳性对照（如标准品）和阴性对照（如水替代模板）。
预混Master Mix：提前配制含荧光染料、酶、dNTP等的主混合液，漩涡振荡混匀后短暂离心，减少分装误差。
引物验证：新引物需通过梯度稀释测试扩增效率，避免非特异性扩增或引物二聚体干扰。
三、RNA HS Assay Kit操作技巧：
1.加样规范
精准移液：使用经校准的移液器，加样时垂直插入液面下，避免气泡产生。
顺序调整：最后加入模板RNA或反转录产物，减少交叉污染风险。
预混震荡：加样后轻轻拍打管壁混匀，或使用低速涡旋仪。
2.避免RNA降解
冰上操作：全程在冰盒或低温金属板上操作，尤其是RNA模板和逆转录步骤。
DNase处理：若RNA含痕量DNA，需用无核酸酶的DNase I处理，并彻*去除酶活性。
使用RNA酶抑制剂：在反应体系中添加RNase 抑制剂，尤其在样本量低时。
3.仪器设置
荧光阈值调整：在指数扩增期设定阈值，避免过高或过低。
温度校准：定期检查PCR仪的温控准确性。
多通道校正：若使用多通道荧光检测，需对各通道进行交叉补偿校准。
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