DNA建库方法大致可分为这几种类型

更新时间：2022-02-21 点击次数：4016

　　DNA分子的功能是贮存决定物种性状的几乎所有蛋白质和RNA分子的全部遗传信息，对DNA信息的解读，对于我们研究生命的奥秘、疾病的机理等有着重要的意义。DNA类的文库主要分为：DNA小片段文库、DNA大片段文库、Exon文库、PCR-Free文库和单细胞文库等。DNA建库方法是分子生物学的实验原理，其本质就是在待测片段两端加上接头的过程。

　　DNA小片段文库是指片段大小在1kb以下的普通DNA文库（200bp、350bp、500bp等），DNA小片段文库可用来进行人重测序，动植物、微生物的de novo和重测序，16s rRNA测序，宏基因组测序等项目类型的文库构建。

　　DNA大片段文库，又称之为末端配对（mate-paired）文库，片段长度大于1kb，主要用于动植物，微生物的de novo测序。

　　PCR-Free文库，顾名思义，就是在文库构建过程中不需要进行PCR的文库。主要是针对一些特殊样本，比如GC含量高、PCR扩增困难的样本和PCR产物。不足之处在于所需的样本起始量较少。

　　Exon文库：人类外显子组总共约30 Mb，占人类基因组约1%，外显子具有高度的保守型，且大部分疾病的致病位点位于外显子区。外显子测序是指利用序列捕获技术将外显子区域DNA捕捉并富集后进行高通量测序的基因组分析方法。Exon文库主要用于人全外显子测序和目标区域测序。

　　单细胞DNA文库：随着二代测序技术的发展，把一次实验测许多条DNA序列的这个难题解决之后，一次把一个人的全基因组给测出来，最极限的情况，就是样本量少到一个细胞，就可以测出整个基因组的序列信息。

　　目前DNA建库方法按照接头连接方式不同可分为五类：

　　1、PCR扩增子建库；

　　2、Swift法建库；

　　3、转座酶法建库；

　　4、TA克隆连接接头建库；

　　5、平末端连接接头建库。

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